GLUT1基因有效siRNA序列的筛选实验研究

作     者：王耀东 李生娇 廖建兴 WANG Yao-dong;LI Sheng-jiao;LIAO Jian-xing

作者机构：同济大学附属口腔医院口腔颌面外科上海200072 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81102047) 上海市自然科学基金资助项目(10ZR1432900) 中央高校基本科研业务费专项资金资助项目 

出 版 物：《口腔颌面外科杂志》 (Journal of Oral and Maxillofacial Surgery)

年 卷 期：2012年第22卷第5期

页      码：312-317页

摘      要：目的:设计合成干扰葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)基因表达的不同小型干扰RNA(siRNA),筛选出能高效抑制GLUT1基因表达的siRNA。方法:根据人GLUT1 mRNA的序列,设计合成4对不同的针对GLUT1的siRNA,应用脂质体LipofectamineTM2000转染试剂转染293T细胞制作病毒,将4对siRNA转染人舌鳞癌细胞Cal-27,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测GLUT1 mRNA表达;Western印迹法检测GLUT1蛋白表达;18F-FDG检测GLUT1基因干扰后对Cal-27细胞摄取葡萄糖的影响。结果:设计合成的4对siRNA中有2对可有效抑制GLUT1的基因表达以及细胞对葡萄糖的摄取。结论:成功设计合成了针对GLUT1基因的siRNA,并从中筛选出能特异且高效阻断GLUT1表达的siRNA,为进一步应用RNA干扰技术进行GLUT1基因沉默,从而进行肿瘤的基因治疗奠定了实验基础。

主 题 词：葡萄糖转运蛋白1(GLUT1) RNA干扰 siRNA 肿瘤 基因治疗 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-4979.2012.05.002

馆 藏 号：203796304...