实时LAMP法快速检测食用植物油中的转基因成分CaMV-35S

作     者：李向丽 谭贵良 刘垚 林霖 赖心田 

作者机构：中山火炬职业技术学院生物医药系广东中山528436 广东省中山市质量计量监督检测所广东中山528403 深圳市计量质量检测研究院广东深圳518109 

基　　金：国家质检总局科技计划项目(2013QK274) 广东省质监局科技计划项目(2009ZZ11) 

出 版 物：《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期：2014年第30卷第2期

页      码：244-248,222页

摘      要：环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一项新的DNA扩增技术,近年来已被成功应用于转基因作物中外源基因的检测分析。本文针对花椰菜花叶病毒35 S启动子(CaMV-35S)设计引物以及有效提取目标DNA后,首次建立了食用植物油中CaMV-35S启动子的LAMP检测方法。通过在DNA提取过程中加入正己烷乳化和加入共沉淀剂,获得了可以进行LAMP扩增的DNA片段,采用LAMP实时浊度法和染色法对扩增产物进行比较分析。着重对FIP/BIP引物、甜菜碱和Mg2+浓度等反应参数进行了优化。结果表明,LAMP方法能够在56 min内特异性地检测到CaMV-35S启动子,检测灵敏度比常规PCR高10倍,而且不需要特别的仪器设备,扩增产物可通过观察实时浊度曲线或通过SYBR Green I染色后借助肉眼对检测结果进行判断。该方法快速高效、操作简便、灵敏度高、检测结果准确,适合食用植物油中转基因成分的快速检测。

主 题 词：环介导等温扩增技术 植物油 转基因 CaMV-35S 核酸提取 

学科分类：0832[0832] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 070302[070302] 0703[理学-化学类] 083202[083202] 

核心收录：

D　O　I：10.13982/j.mfst.1673-9078.2014.02.003

馆 藏 号：203796849...