MACC1基因shRNA慢病毒表达载体的构建及转染MB-231细胞

作     者：闵捷 吕钢 王婷 甘霖 曾真 王亚冬 Min Jie;Lv Gang;Wang Ting;Gan Lin;Zeng Zhen;Wang Yadong

作者机构：重庆市中医院乳腺甲状腺科重庆400021 

出 版 物：《重庆医学》 (Chongqing medicine)

年 卷 期：2014年第43卷第12期

页      码：1474-1475,1479页

摘      要：目的构建结肠癌转移相关基因1(MACC1)RNAi慢病毒表达载体,并转染人乳腺癌细胞株MB-231,观察其最佳感染条件。方法设计并合成MACC1基因特异性的DNA寡核苷酸,连接到经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中,转化大肠埃希菌DH5a感受态细胞,筛选阳性菌落、扩增后提取质粒,进行DNA测序鉴定。用293FT细胞包装产生慢病毒,感染MB-231细胞,选择感染效率高、感染复数(MOI)低的感染条件。结果 PCR与测序鉴定证实成功构建了MACC1RNAi的慢病毒载体,可以高效转染MB-231细胞,其最佳感染条件为MOI=40。结论成功构建了MACC1RNAi慢病毒表达载体,其可高效感染MB-231,为进一步研究靶向MACC1RNAi对乳腺癌细胞恶性生物学行为变化及基因治疗研究奠定了实验基础。

主 题 词：结肠癌转移相关基因1 RNA干扰 慢病毒载体 人乳腺癌细胞株MB-231 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-8348.2014.12.022

馆 藏 号：203796940...