犬结核SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：王伟 陈鸿军 刘佩红 王水明 周锦萍 于圣青 丁铲 

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 上海市动物疫病预防控制中心上海200102 江苏省出入境检验检疫局南京211000 

基　　金：上海市科技兴农重点项目(沪农科攻字(2006)第5-4号) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2009年第17卷第2期

页      码：55-59页

摘      要：本研究基于IS1081基因建立了鉴定犬结核的SYBRGreen荧光定量PCR方法。在最佳反应条件下反应效率为1．09，获得的标准曲线相关系数R值达0．9995，标准曲线的线性范围达到1～1×10^7拷贝8个数量级，最低可检测到约10个目的拷贝，即31．4fg DNA。根据溶解曲线分析，扩增产物中无引物二聚体的影响，说明所设计引物特异，退火温度合适。这表明本研究建立的SYBR Green荧光定量方法灵敏度高、定量范围广。利用该方法对临床样品进行检测，结果发现：与结核杆菌分离培养方法比较，符合率为85％。240份犬猫鼻拭子中150份被检测为阳性，这说明犬猫鼻腔中分枝杆菌携带率很高。

主 题 词：结核分技杆菌 IS1081 SYBR Green 荧光定量PCR 

学科分类：090603[090603] 0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-6422.2009.02.009

馆 藏 号：203804552...