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多重PCR同时检测病原菌及其耐药基因

多重PCR同时检测病原菌及其耐药基因

作     者:黄艳飞 鲁辛辛 孙宇峰 HUANG Yan-fei;LU Xin-xin;SUN Yu-feng

作者机构:首都医科大学附属北京同仁医院检验科北京100730 

出 版 物:《中国实验诊断学》 (Chinese Journal of Laboratory Diagnosis)

年 卷 期:2011年第15卷第4期

页      码:623-625页

摘      要:目的建立一种多重PCR方法,在同一扩增体系内同时检测病原菌及其β-内酰胺类耐药基因,探讨采用多重PCR同时鉴定病原菌及其耐药基因的可行性。方法根据细菌基因序列和对β-内酰胺类抗生素耐药特点,设计一对细菌鉴定通用引物和三对β-内酰胺类耐药基因引物,并在同一扩增体系内行PCR扩增。结果 MRSA和大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的产酶标准菌株的bla mecA、blaTEM、blaSHV和16S-23S rRNA基因间隔区(ISR)多重扩增均为阳性,对本实验室内保存的50株多重耐药的葡萄球菌(包括40株表型筛查为MRS菌株及10株非MRS菌株)及30株ESBLs阳性的大肠埃希菌及30株肺炎克雷伯菌的多重PCR结果显示:MRS阳性菌株均同时扩增出了葡萄球菌特有的多态性及blamecA指纹图谱,而多重耐药的非MRS菌株也都扩增出了blamecA,ESBLs表型阳性的大肠埃希菌多以blaTEM为主,而肺炎克雷伯菌多以blaSHV为主。结论多重PCR与传统的培养及药敏试验相比敏感、特异、迅速,对于解决难培养或不能培养的微生物的鉴定和药敏试验,是一种很有前景的方法。

主 题 词:多重PCR 耐药性 基因 

学科分类:100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1007-4287.2011.04.018

馆 藏 号:203804569...

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