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HBV特异性核酶与HDV重组体的体外转录及切割活性研究

HBV特异性核酶与HDV重组体的体外转录及切割活性研究

作     者:戴炜 周荣 董艳荣 温淑娟 禹弘 

作者机构:广东省深圳市东湖医院518020 

基  金:本课题受广东省自然科学基金资助 

出 版 物:《实用肝脏病杂志》 (Journal of Practical Hepatology)

年 卷 期:2003年第6卷第4期

页      码:193-196页

摘      要:目的利用基因重组技术,用核酶基因置换HDV部分基因,分别用HBV特异性核酶(rRZ)和核酶-HDV重组体(rHDVRZA、rHDVRZB和rHDVRZC)研究体外转录与剪切HBV的活性。方法 将含有83lbp的HBV C基因片段的质粒pTA-HBV用BamHI消化成线性后,体外转录获取5’端32P标记靶HBV C RNA。将获得的3个核酶-HBV重组体rHDVRZA、rHDVRZB和rHDVRZC克隆于pGEM-T载体T7启动子下游进行非标记的大量转录。分别将rRZ、rHDVRZA、rHDVRZB和rHDVRZC与卫32P-HBV C RNA按一定比例和条件保温切割。结果 体外实验证明rRZ、rHDVRZA、rHDVRZB和rHDVRZC在37℃具有酶切活性。提示所设计的核酶-HDV重组体rHDVRZA和rHDVRZB中核酶结构正确。结论在HDV基因组不同位置插入核酶,能够维持酶正确结构的核酶-HDV具有体外特异性切割HBV的活性。

主 题 词:乙型肝炎病毒 丁型肝炎病毒 核酶 

学科分类:1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1672-5069.2003.04.001

馆 藏 号:203807881...

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