HIV-1复合多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒疫苗的构建及小鼠免疫原性

作     者：张立树 金宁一 宋英今 王宏 马鹤雯 李子健 江文正 

作者机构：军事医学科学院十一所全军基因工程重点实验室长春130062 天津大学农业与生物工程学院天津300072 暨南大学生命科学院生物系广州510632 Department of Biochemistry and Molecular BiologyOklahoma state UniversityStillwater74078 北京大学第三医院血管医学研究所北京100083 华东师范大学生命科学学院上海200026 

基　　金：国家高技术研究发展计划资助项目("863"项目 批准号:2003AA219051) 

出 版 物：《中国科学（C辑）》 (Science in China(Series C))

年 卷 期：2007年第37卷第1期

页      码：65-72页

摘      要：将HIV-1p24基因插入至人工设计的复合多表位基因MEG中,获得嵌合基因MEGp24;将MEGp24插入到转移载体pUTA2复合启动子ATI-P7.5×20下游,构建出鸡痘病毒重组转移质粒;经转染和BrdU加压筛选,以基因组PCR和Western blot法筛选出重组病毒;将重组病毒大量制备并纯化后,分别于0,14,42天肌肉注射免疫BALB/c小鼠;第3次免疫后一周,采集小鼠全血与脾脏,分离血清并无菌制备脾淋巴细胞,ELISA法检测小鼠血清HIV-1抗体、脾细胞培养上清中Th1类细胞因子IFN-α和IL-2的含量,流式细胞仪测定CD4+,CD8+T淋巴细胞亚类数量,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测脾特异性CTL杀伤活性.结果表明,重组病毒刺激小鼠产生HIV-1特异性抗体,出现T细胞亚类数量增加,产生针对HIV-1 H-2d限制性CTL表位的特异性靶细胞杀伤作用,同时免疫小鼠脾细胞在HIV-1抗原肽的刺激下分泌Th1类细胞因子的水平大幅增加.研究提示多表位嵌合基因重组FPV疫苗具有良好的免疫原性,可诱导小鼠产生HIV-1特异性细胞和体液免疫应答.

主 题 词：Ⅰ型人免疫缺陷病毒 多表位 重组 鸡痘病毒 免疫 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-7232.2007.01.010

馆 藏 号：203809228...