VEGF-C基因靶向RNA干扰重组表达载体的构建和表达

作     者：周慧聪 亢春彦 张艳 李继昌 Hui-Cong Zhou;Chun-Yan Kang;Yan Zhang;Ji-Chang Li

作者机构：郑州大学第一附属医院消化内科河南省郑州市450052 河南省职工医学院病理教研室河南省郑州市450052 郑州大学基础医学院药理教研室河南省郑州市450052 

出 版 物：《世界华人消化杂志》 (World Chinese Journal of Digestology)

年 卷 期：2007年第15卷第13期

页      码：1549-1553页

摘      要：目的:利用质粒pSilencer3.1-H_1构建针对人血管内皮生长因子-C(VEGF-c)基因的表达载体,测序鉴定并观察在胃癌细胞中的表达.方法:根据质粒pSilencer3.1-H_1要求设计两对小干扰RNA靶序列,退火形成互补的双链,通过与线性化的pSilencer3.0-H_1相应位点连接、转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,酶切电泳及测序鉴定后转染胃癌细胞株SGC-7901,Western blot检测转染前后VEGF-C基因的蛋白表达.结果:经酶切和测序鉴定,针对VEGF-C基因的siRNA表达载体构建成功.转染胃癌细胞株SGC-7901后,Western blot检测显示VEGF-C基因蛋白表达明显降低,pSilencer3.1-VEGF-C1组抑制效果明显,其抑制率为81.2%,与阴性对照组相比差异具有显著性(P<0.05).结论:成功构建了针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体和稳定转染的胃癌细胞株SGC-7901.

主 题 词：胃癌 血管内皮生长因子-C 重组质粒 RNA干扰 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-3079.2007.13.018

馆 藏 号：203809314...