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玉米赤霉烯酮水解酶耐热性的分子改造

玉米赤霉烯酮水解酶耐热性的分子改造

作     者:许中霞 刘桂智 刘卫东 郭瑞庭 李华钟 郑迎迎 XU Zhongxia;LIU Guizhi;LIU Weidong;GUO Ruiting;LI Huazhong;ZHENG Yingying

作者机构:江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 中国科学院天津工业生物技术研究所天津300308 

基  金:国家自然科学基金项目(31400678) 国家863计划项目(2012AA022209) 江苏省优势学科建设工程资助项目 

出 版 物:《食品与生物技术学报》 (Journal of Food Science and Biotechnology)

年 卷 期:2019年第38卷第7期

页      码:71-77页

摘      要:内酯水解酶ZHD101对玉米赤霉烯酮降解效果显著,是目前研究最广泛的玉米赤霉烯酮降解酶,但由于热稳定性较低,无法满足饲料生产制粒过程中的温度要求。作者利用理性设计和分子改造在其分子中引入二硫键,以提高ZHD101的热稳定性。通过在分子引入七对半胱氨酸双突变(A110C/P196C、S136C/R189C、D143C/P181C、S147C/P181C、D199C/A202C、L200C/A231C、R204C/G205C)以形成潜在的二硫键,研究其对热稳定性的影响。结果表明,突变体S136C/R189C和D143C/P181C在50℃加热处理2 min后的残余活性高于野生型,其中突变体D143C/P181C的残余活性是野生型的2倍,且室温下活力损失小于10%。在此基础上设计四突变(S136C/D143C/P181C/R189C),热稳定性和活力并不优于双突变D143C/P181C。本研究结果为提高ZHD101在饲料工业上的应用潜力打下了基础。

主 题 词:玉米赤霉烯酮 内酯水解酶 热稳定性 二硫键 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 07[理学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1673-1689.2019.07.010

馆 藏 号:203809325...

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