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逆转录环介导等温扩增技术检测齿兰环斑病毒

逆转录环介导等温扩增技术检测齿兰环斑病毒

作     者:樊荣辉 罗远华 钟淮钦 叶秀仙 黄敏玲 FAN Rong-hui;LUO Yuan-hua;ZHONG Huai-qin;YE Xiu-xian;HUANG Min-ling

作者机构:福建省农业科学院作物研究所福建福州350013 福建省农业科学院花卉研究中心福建福州350013 福建省特色花卉工程技术研究中心福建福州350013 

基  金:福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项(2017R1026-8) 福建省财政专项——福建省农业科学院科技创新团队建设项目(STIT2017-2-9) 福建省农业科学院生产性工程化实验室中试基金(AG2017-2) 

出 版 物:《福建农业学报》 (Fujian Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期:2019年第34卷第7期

页      码:824-828页

摘      要:【目的】齿兰环斑病毒Odontoglossum ringspot virus(ORSV)是侵染兰花的主要病毒,严重影响其观赏价值,建立快速、灵敏的检测方法显得尤为重要。【方法】本研究根据ORSV的外壳蛋白基因序列设计了一组特异性引物,经过一系列条件优化,建立了该病毒的RT-LAMP(Reverse Transcription-Loop-mediated Iisothermal Amplification)检测方法。【结果】结果显示该方法能特异扩增ORSV,与其他4种侵染兰花的病毒(建兰花叶病毒、菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒和小苍兰花叶病毒)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍。田间检测20份样品中,RT-LAMP和RT-PCR检测结果一致。在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ直接用肉眼观察即可判断样品是否感染ORSV,省去电泳分析的时间,并且增加了在田间的应用价值。【结论】该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点。

主 题 词:齿兰环斑病毒 RT-LAMP 检测 

学科分类:09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

D O I:10.19303/j.issn.1008-0384.2019.07.011

馆 藏 号:203809944...

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