HOTAIR上调miR-152靶向调控HLA-G的生物信息作用预测与验证

作     者：李晓娟 周芝熠 王珏 钱源 LI Xiao-juan;ZHOU Zhi-yi;WANG Jue;QIAN Yuan

作者机构：昆明医科大学第一附属医院产科650032 昆明医科大学第一附属医院医学检验科产前诊断室650032 云南省内设研究机构实验诊断研究所 云南省检验医学重点实验室 

基　　金：昆明医科大学研究生创新基金项目(2018S098) 云南省高层次卫生技术人才培养(后备人才)资助项目(H-201628) 云南省教育厅科学研究基金项目(2016ZZX090) 2017年国家自然科学基金院内匹配资助项目(81760273) 

出 版 物：《天津医药》 (Tianjin Medical Journal)

年 卷 期：2019年第47卷第10期

页      码：1014-1019页

摘      要：目的预测并验证HOX转录反义RNA(HOTAIR)通过上调miR-152-3p对人类白细胞抗原-G(HLA-G)靶向调控作用。方法利用生物信息学网站及软件预测miR-152-3p与HOTAIR和HLA-G基因3′非翻译区(UTR)的结合位点,设计合成含有与miR-152-3p结合位点的HOTAIR和HLA-G基因3′-UTR序列及其突变序列,并构建HOTAIR和HLA-G野生型和突变型双荧光素酶报告基因载体。经双酶切电泳和测序鉴定后,HOTAIR和HLA-G野生型与突变型双荧光素酶报告基因载体分别与miR-152-3p模拟物(mimics)和miRNA无义序列阴性对照(mimicsNC)共转染HTR-8/SVneo细胞,检测荧光素酶活性,观察miR-152-3p对HOTAIR和HLA-G表达的影响。结果双酶切电泳和测序结果显示,野生型和突变型的HOTAIR和HLA-G基因载体片段大小、序列与实验预期一致,载体构建成功。转染miR-152-3pmimics后的HOTAIR及HLA-G野生型荧光素酶活性显著降低(P0.05)。结论HOTAIR通过上调miRNA-152-3p靶向调控HLA-G。

主 题 词：HLA-G抗原 基因,报告 HOTAIR miR-152-3p HTR-8/SVneo 双荧光素酶报告基因 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 08[工学] 0836[0836] 

D　O　I：10.11958/20190638

馆 藏 号：203810044...