鸡蛋主要过敏原Gal d1片段基因的克隆、表达、纯化及免疫学鉴定

作     者：马艳梅 黄钟 刘志刚 闫浩 王和平 罗新萍 孔小丽 

作者机构：深圳大学医学院518060 深圳大学医学院呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室518060 深圳市儿童医院内五科518026 

基　　金：深圳市科技计划项目(JC200903130238A) 

出 版 物：《免疫学杂志》 (Immunological Journal)

年 卷 期：2010年第26卷第7期

页      码：589-593页

摘      要：目的克隆、表达和纯化鸡蛋主要过敏原Gald1区基因,并对其免疫学活性进行鉴定。方法用生物信息学方法对鸡蛋主要过敏原Gald1基因进行抗原表位预测,设计特异性引物,用PCR的方法分别扩增Gald1N端和C端基因,将其分别连接到原核表达载体PET32a上。重组质粒转入大肠杆菌,用IPTG诱导表达,通过镍亲和柱层析法纯化重组蛋白,最后用Western-blotting检测重组蛋白的免疫原性。结果表达的蛋白均以可溶性为主,N端融合蛋白相对分子质量为28600,C端融合蛋白相对分子质量为26800,纯化的N端和C端蛋白均有较好的免疫原性,C端的免疫原性强于N端。结论成功地克隆和表达了鸡蛋主要变应原基因Gald1的N端和C端,为鸡蛋过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础。

主 题 词：鸡蛋过敏原 Gald1 克隆 表达 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13431/j.cnki.immunol.j.20100138

馆 藏 号：203810501...