多引物小型集合HIV核酸检测技术的建立及在男男性接触者急性感染检测中应用

作     者：吴亚松 刘志英 焦艳梅 魏飞力 徐萌 张彤 黄晓婕 张福杰 陈德喜 徐小宁 吴昊 WU Ya-song;LIU Zhi-ying;JIAO Yan-mei;WEI Fei-li;XU Meng;ZHANG Tong;HUANG Xiao-jie;ZHANG Fu-jie;CHEN De-xi;XU Xiao-ning;WU Hao

作者机构：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心102206 首都医科大学附属北京佑安医院性病艾滋病诊疗中心 

基　　金：基金项目:北京市科委艾滋病重大项目(D09060030405912) “十一五”国家科技重大专项课题一艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治资助项目(2008ZX10001-006) 

出 版 物：《中华检验医学杂志》 (Chinese Journal of Laboratory Medicine)

年 卷 期：2010年第33卷第9期

页      码：862-866页

摘      要：目的 建立结合多重反转录巢式PCR技术检测HIV RNA的小型集合NAT,用于MSM人群急性感染的筛查诊断.方法 利用2008年10月至2009年3月期间从3名HIV窗口期感染者、30名HIV慢性感染者、97名健康人采集冻存的EDTA抗凝血浆建立小型集合NAT.将10份待测标本混合组成1个集合,离心富集病毒,提取RNA 针对HXB2的nt5783-nt6228和nt1235-nt2012区分别设计2对引物 采用多重RT-PCR、巢式PCR扩增2个目标区的核酸片段,对结果阳性的集合中标本进一步分别检测.确定小型集合NAT的灵敏度,并进行验证.应用建立的方法对1 005份与上述标本同一时期收集的MSM人群的HIV抗体阴性血浆进行检测.结果 （1）成功扩增出目标区的2条特异性片段,灵敏度为162拷贝/ml （2）对3份HIV窗口期感染者标本用小型集合NAT方法盲法验证的结果和预期一致 （3）用多重RT-PCR和巢式PCR对30份HIV抗体阳性标本检测,阳性率100%（30/30） （4）发现1 005份血浆标本中有1份为HIV RNA阳性,追踪随访发现HIV-1抗体转阳.结论 本研究中建立多引物小型集合RT-PCR、巢式PCR结合的小型集合NAT的敏感性好,可用于MSM人群HIVG感染窗口期筛查检测.

主 题 词：HIV感染 同性恋,男性 HIV-1 核酸扩增技术 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2010.09.012

馆 藏 号：203810588...