SPACR原核表达载体的构建和表达

作     者：赵劲松 黄岚峰 王淑荣 ZHAO Jin-song;HUANG Lan-feng;WANG Shu-rong

作者机构：吉林大学第二医院眼科医院眼底病一科吉林长春130041 吉林大学第二医院骨科吉林长春130041 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31071222) 吉林省科技发展计划资助项目(200705232 200705242) 

出 版 物：《中国实验诊断学》 (Chinese Journal of Laboratory Diagnosis)

年 卷 期：2011年第15卷第8期

页      码：1231-1235页

摘      要：目的构建Sialoprotein associated with cones and rods(SPACR)原核表达载体并高效表达。方法根据基因文库中SPACR基因的cDNA序列设计引物,采用PCR方法扩增SPACR cDNA片段,并克隆进原核表达载体pGEX-6P-1中,转化于大肠杆菌BL21,测序鉴定后,用IPTG诱导表达出目的蛋白,经谷胱甘肽琼脂糖柱柱层析纯化,收获表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western blot鉴定。结果 PCR后扩增得到的目的片段,经酶切鉴定及DNA序列测定,证实重组载体pGEX-6P-1-SPACR构建正确,表达蛋白分子量约为分别为21.2、22.6、36.2及20.8kDa。结论在大肠杆菌中获得了SPACR片段的高效表达,为研究其蛋白功能奠定了基础。

主 题 词：SPACR 原核表达 融合蛋白 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100212[100212] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-4287.2011.08.001

馆 藏 号：203810976...