体内精原干细胞介导法制备抗病转基因鸡

作     者：孙敏 施青青 阴彦辉 傅德智 秦玉蓉 许峰 李碧春 

作者机构：扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 

基　　金：国家自然科学基金(30871791) “六大人才高峰”项目 江苏省高校自然科学重大基础研究项目(08KJA230001) 

出 版 物：《中国畜牧杂志》 (Chinese Journal of Animal Science)

年 卷 期：2011年第47卷第19期

页      码：1-6页

摘      要：实验旨在利用精原干细胞介导的方法体内转染融合基因EGFP-MMx,制备抗病毒性疾病转基因鸡。采用脂质体包埋法,睾丸内注射EGFP-MMx融合基因,术后采集30、40、50、60、70、80 d睾丸组织进行冰冻切片、基因组PC R、点杂交实验,转染后60 d公鸡精液人工授精于正常母鸡,对后代血液采用PC R检测技术、R T-PC R和W estern blot方法检测外源基因EGFP-MMx的整合表达情况。结果表明:睾丸基因组点杂交阳性率为72.2%。通过PC R、R T-PCR检测方法,在实验公鸡精液和F1代血液中检测到目的基因,精液阳性率为25%,F1代阳性率为10.53%,Western blot检测F1代阳性率为7.89%。结果证明外源基因通过睾丸注射法可整合到基因组上,为培育抗病转基因鸡提供参考依据。

主 题 词：精原干细胞 EGFP—MMx融合蛋白 转基因鸡 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 090501[090501] 

馆 藏 号：203811018...