L型氨基酸转运载体1表达下调抑制结直肠癌细胞HT29的增殖和迁移能力

作     者：杨张朔 王昕 杨铁成 黄牛 孔秀英 黄智民 卢作鹏 习一清 冯茂辉 Yang Zhangshuo;Wang Xin;Yang Tiecheng;Huang Niu;Kong Xiuying;Huang Zhiming;Lu Zuopeng;Xi Yiqing;Feng Maohui

作者机构：武汉大学中南医院胃肠外科武汉市腹膜癌临床医学研究中心湖北省肿瘤医学临床研究中心肿瘤生物学行为湖北省重点实验室430071 通城县人民医院胃肠外科湖北通城437400 

基　　金：国家自然科学基金(81770283) 湖北省卫生与计划生育委员会科研基金(WJ2017M249) 武汉市腹膜癌临床医学研究中心资助项目(2015060911020462) 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2019年第36卷第10期

页      码：1795-1797页

摘      要：目的观察L型氨基酸转运载体1(LAT1)对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法设计并合成靶向LAT1的小干扰RNA(siLAT1)和阴性对照小干扰RNA(siCON),并在结直肠癌细胞株HT29中进行转染,48 h后利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测目的基因mRNA和蛋白水平的表达,进行敲降效率的验证.利用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测干扰组(siLAT1组)和阴性对照组(siCON组)细胞增殖,利用Transwell实验检测siLAT1组和siCON组细胞的迁移能力.结果 siLAT1和siCON瞬时转染HT29细胞48 h后,siLAT1对HT29细胞LAT1 mRNA表达的抑制率为(73.2±5.2)%,差异有统计学意义(t=11.410,P<0.01).Western blot结果进一步证实靶向LAT1的小干扰RNA(siRNA)的敲减效率(0.68±0.06比0.21±0.04,t=4.492,P<0.05).CCK-8实验表明LAT1基因敲降后的细胞株HT29增殖能力弱于阴性对照组(P<0.01).Transwell迁移实验表明在转染后siLAT1组迁移细胞数明显小于阴性对照组(66 ±11比156±29,t=5.083,P<0.05).结论 LAT1表达下调抑制了结直肠癌肿瘤细胞的增殖和迁移过程.

主 题 词：L型氨基酸转运载体1 结直肠癌 小干扰RNA 增殖 迁移 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.10.019

馆 藏 号：203811148...