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桃果实PpPAE基因的原核表达载体构建与诱导表达

桃果实PpPAE基因的原核表达载体构建与诱导表达

作     者:丛丽君 王滨 段艳欣 吴军帅 冯静 CONG Li-jun;WANG Bin;DUAN Yan-xin;WU Jun-shuai;FENG Jing

作者机构:青岛农业大学园艺学院青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室山东青岛266109 

基  金:国家青年基金项目(NSFC 30900976) 青岛农业大学第六届大学生创新教育立项项目 

出 版 物:《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期:2014年第29卷第2期

页      码:18-21页

摘      要:为构建桃果胶乙酰酯酶(PpPAE)基因的原核表达载体pET-32a(+)-PpPAE,并获得稳定高效表达的重组蛋白,以青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室前期获得的PpPAE基因(GenBank登录号KF017595)序列为依据,设计引物并扩增其cDNA片段,重组到原核表达载体pET-32a(+)中,将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,并用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物。结果表明,已成功构建原核表达载体pET-32a(+)-PpPAE,重组质粒在0.1 mmol/L IPTG浓度下诱导4 h后,有大量融合蛋白表达,分子量约为64 kDa。为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。

主 题 词: 果胶乙酰酯酶 原核表达 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 0836[0836] 090201[090201] 090102[090102] 

核心收录:

馆 藏 号:203812283...

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