基于CRISPR/Cas9技术创建OssHSP家族基因突变体

作     者：陈亚新 陈秋生 陈洁 张月婷 杨璐 帅艳玲 彭晓珏 Chen Yaxin;Chen Qiusheng;Chen Jie;Zhang Yueting;Yang Lu;Shuai Yanling;Peng Xiaojue

作者机构：南昌大学生命科学学院江西省分子生物学与基因工程重点实验室 

基　　金：江西省自然科学基金项目(20181BAB204007) 江西省杰出青年人才资助计划(20171BCB23021) 国家自然基金项目(31760377) 江西省研究生创新专项资金项目(YC2016-S063) 南昌大学研究生创新专项资金项目(CX2016193 CX20-17135)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2019年第17卷第19期

页      码：6343-6349页

摘      要：分子伴侣是在生物大分子的折叠、组装、转运及降解等过程中起协助作用,但自身并不发生任何变化的一大类广泛存在于生物体内的蛋白质分子。小热激蛋白(small heat shock protein,sHSP)是一类在抵抗逆境胁迫过程中扮演重要角色的蛋白质分子。本研究在OssHSP基因外显子区域设计了带有PAM序列的靶位点,利用PCR扩增获得OssHSP基因sgRNA表达盒,成功构建了CRISPR/Cas9敲除载体;利用根癌农杆菌介导的遗传转化获得2个OssHSP基因(Os01g0136100和Os02g0782500)的T0代CRISPR转基因植株;通过PCR扩增和测序确定突变类型,获得48株不同突变类型的OssHSP1突变单株,6株不同突变类型的OssHSP2突变单株,6株不同突变类型的OssHSP1和OssHSP2双突变单株,为进一步开展OssHSP基因功能的研究提供了材料。

主 题 词：分子伴侣 OssHSP家族基因 CRISPR/Cas9技术 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.13271/j.mpb.017.006343

馆 藏 号：203817502...