肺炎衣原体CPn0308的基因克隆及其内源性蛋白定位的研究

作     者：贾天军 刘殿武 罗建华 张庶民 钟光明 

作者机构：河北医科大学流行病学教研室石家庄050017 Department of Microbiology and ImmunologyUniversity of TexasHealth Science Center at San Antonio7703 Floyd Curl DriveSan AntonioTexas 78229USA. 中国药品生物制品检定所血清室 

出 版 物：《卫生研究》 (Journal of Hygiene Research)

年 卷 期：2008年第37卷第2期

页      码：219-222页

摘      要：目的克隆肺炎衣原体基因CPn0308,表达融合蛋白,并制备抗体对其表达的内源性蛋白进行初步定位。方法根据STD基因库提供的信息设计引物,聚合酶链反应(PCR)克隆目的基因,用BamHI/NotI对克隆的目的基因和pGEX-6P2载体进行酶切,T4连接酶连接后,重组质粒经42℃转化XL1-blue细菌;用PCR进行初步筛选,交叉PCR对提取质粒进一步确定,最后对插入片断进行序列分析;用IPTG诱导阳性克隆的细菌使其表达GST融合蛋白,纯化后免疫小鼠制备抗体,使用IFA对内源性蛋白进行定位分析。结果克隆出肺炎衣原体基因CPn0308,全长为366bp,编码121个氨基酸;并表达了融合蛋白GST-CPn0308,分子量约为39kD;制备了抗体,IFA实验发现该蛋白初步定位于肺炎衣原体包涵体膜蛋白上。结论成功克隆肺炎衣原体基因CPn0308,其内源性蛋白初步定位于肺炎衣原体包涵体膜上。

主 题 词：肺炎衣原体 基因克隆 内源性蛋白 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 100401[100401] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-8020.2008.02.026

馆 藏 号：203819142...