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Hlx修饰的树突状细胞系(DC2.4/mHlx)的建立

Hlx修饰的树突状细胞系(DC2.4/mHlx)的建立

作     者:何志强 王胜军 薛渊 石燕 柳迎照 仝佳 陈建国 邵启祥 许化溪 

作者机构:江苏大学检验医学研究所免疫学研究室江苏镇江212013 江苏大学附属人民医院检验科江苏镇江212001 

基  金:国家自然科学基金资助项目(30871193 30972748) 江苏省卫生厅资助项目(H200952/200859) 

出 版 物:《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期:2010年第26卷第3期

页      码:285-287,290页

摘      要:目的:建立稳定、高表达鼠转录因子Hlx的树突状细胞系DC2.4/mHlx。方法:参照GenBank中mHlx基因序列,设计mHlxCDS全长引物;以PGEM-T/mHlx质粒为模板,通过PCR获得目的基因,再克隆到PIRES2-EGFP真核表达载体,经PCR、酶切鉴定后进行序列测定,用脂质体转染DC2.4;应用G418筛选出耐药克隆,有限稀释法进行单克隆。通过观察EGFP的表达选定单克隆细胞株,再用流式细胞术分析、Real-time PCR和Western blot进行鉴定。结果:构建了PIRES2-mHlx-EGFP真核表达载体,并成功建立mHlx修饰和EGFP修饰的细胞系(DC2.4/mHlx和DC2.4/EGFP)。结论:成功建立稳定高表达mHlx的树突状细胞系DC2.4/mHlx,为深入探讨mHlx功能构建了平台,为Hlx修饰后的树突状细胞作为工具细胞的应用奠定了基础。

主 题 词:mHlx DC2.4 EGFP 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071009[071009] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.13423/j.cnki.cjcmi.005391

馆 藏 号:203819175...

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