多重PCR快速鉴定分枝杆菌方法的建立

作     者：尹树鹏 言晨绮 刘志广 赵秀芹 李晓琴 李马超 刘海灿 楼永良 万康林 Yin Shupeng;Yan Chenqi;Liu Zhiguang;Zhao Xiuqin;Li Xiaoqin;Li Machao;Liu Haican;Lou Yongliang;Wan Kanglin

作者机构：温州医科大学检验医学院生命科学学院325035 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 

基　　金：国家科技重大项目(2018ZX10302302-001-001 2018ZX10302302-001-005) 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2019年第39卷第10期

页      码：771-777页

摘      要：目的建立并评估一种快速鉴定分枝杆菌的多重PCR法,为结核病的快速病原诊断提供技术手段.方法选取16S rRNA、Rv0577、RD9和mtbk_20680基因,设计特异性引物,经条件优化,建立多重PCR方法.对非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、卡介苗(BCG)菌株、7种常见的非结核分枝杆菌(NTM)、7种常见的呼吸道病原菌和甘肃省93株结核分枝杆菌(MTB)临床分离株进行检测鉴定,评价其敏感性和特异性.结果16S rRNA、Rv0577、RD9和mtbk_20680基因产物长度分别为543 bp、786 bp、369 bp和231 ***北京基因型的4个基因均为阳性,而非北京基因型mtbk_20680基因为阴性;非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、BCG菌株均为16S rRNA和Rv0577阳性;7种NTM仅16S rRNA为阳性;7种呼吸道菌检测结果均为阴性.93株MTB临床分离株中鉴定为北京基因型菌株的有80株,占86.02%,非北京型菌株有13株,占13.98%.该方法的特异性为100%.结论该多重PCR法可以准确鉴别分枝杆菌、结核分枝杆菌复合群(MTBC)、NTM、MTB、北京基因型与非北京基因型MTB,具有高度的敏感性和特异性.

主 题 词：多重聚合酶链反应 分枝杆菌 结核分枝杆菌 北京基因型 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2019.10.008

馆 藏 号：203819764...