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H3亚型猪流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

H3亚型猪流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者:郭泗虎 王文华 张亮权 齐海涛 曹楠 闫明菲 黄昌力 张超轶 张桂红 GUO Si-hu;WANG Wen-hua;ZHANG Liang-quan;QI Hai-tao;CAO Nan;YAN Ming-fei;HUANG Chang-li;ZHANG Chao-yi;ZHANG Gui-hong

作者机构:华南农业大学兽医学院农业部兽用疫苗创制重点实验室广东广州l510642 

基  金:国家自然科学基金会(NSFC)-广东联合基金项目(U0931003) 国家生猪现代农业产业技术体系(NYCYTX009) 

出 版 物:《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期:2012年第34卷第2期

页      码:124-127页

摘      要:为建立一种快捷、可行的检测H3亚型猪流感病毒(SIV)的方法,本研究根据GenBank中登录的H3亚型SIV HA基因的保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了一种检测H3亚型SIV的SYBR GreenⅠ荧光定量检测方法,并进行灵敏度、稳定性和特异性试验,与普通PCR进行比较。研究结果表明,标准曲线的循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系,R2为0.994,CV在0.17%~1.41%之间,具有良好稳定性。除H3亚型SIV外,对H1、H4、H6、H9亚型SIV以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒和猪圆环病毒2型的检测均为阴性,与普通PCR相比更灵敏。该方法特异性好,准确率高,适于临床分离鉴别H3亚型SIV。

主 题 词:猪流感 H3亚型 实时荧光定量PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1008-0589.2012.02.11

馆 藏 号:203819812...

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