猪肾上皮细胞（PK-15）酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

作     者：李晓月 王春来 倪宏波 Li Xiaoyue;Wang Chunlai;Ni Hongbo

作者机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 

基　　金：黑龙江省自然科学基金项目(C2016067) 黑龙江八一农垦大学研究生科研创新资助项目(YJSCX2017-Y36) 

出 版 物：《黑龙江八一农垦大学学报》 (journal of heilongjiang bayi agricultural university)

年 卷 期：2019年第31卷第5期

页      码：40-45页

摘      要：应用SMART技术构建猪肾上皮细胞(PK-15)酵母双杂交cDNA文库,为进一步筛选与副猪嗜血杆菌(HPS)细胞致死膨胀毒素(CDT)不同亚基蛋白相互作用蛋白奠定基础。提取PK-15的总RNA,经LD-PCR合成双链cDNA,运用SMART技术,再通过同源重组的方法,构建了PK-15细胞的酵母cDNA文库。经检测,文库滴度达到了2.8×10^8CFU·mL^-1,插入的双链cDNA片段范围为300~1000bp,片段平均大小为500bp。此文库可用于筛选与HPSCDT不同亚基蛋白相互作用的蛋白,这将为治疗靶点的选择、基因缺失弱毒活疫苗的设计提供科学依据。

主 题 词：PK-15 SMART技术 酵母双杂交cDNA文库 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2090.2019.05.007

馆 藏 号：203820377...