bFGF小干扰RNA表达质粒抑制人晶状体上皮细胞增殖的实验研究

作     者：徐庆 贾仁兵 XU Qing;JIA Ren-bing

作者机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科200011 

基　　金：上海市卫生局基金资助项目(034084) 

出 版 物：《中华眼科杂志》 (Chinese Journal of Ophthalmology)

年 卷 期：2008年第44卷第12期

页      码：1078-1082页

摘      要：目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）小干扰RNA（siRNA）表达质粒体外转染人晶状体上皮细胞LEC—B3对其增殖的影响，为防治晶状体后囊膜混浊（PCO）的临床研究提供思路。方法实验研究。以永生化的人晶状体上皮细胞LEC—B3为研究对象，首先用针对αB-晶状体蛋白的免疫组织化学方法鉴定LEC-B3细胞来源。在此基础上，用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测LEG—B3细胞中bFGF及其受体1（FGFRI）的mRNA表达。然后，构建bFGF siRNA表达质粒及其对照质粒，并在体外稳定转染LEC—B3细胞，干扰其bFGF基因表达，再用实时定量PCR和Western blot法检测转染后LEC-B3细胞中bFGF基因和蛋白表达，并以流式细胞术检测LEC-B3细胞中细胞增殖核抗原（PCNA）表达。将bFGFsiRNA表达质粒及其对照质粒转染后LEC-B3细胞中PCNA表达水平分别设为实验组和对照组，用成组设计的t检验比较两组PCNA表达差异。结果bFGF和FGFR1的mRNA在LEC—B3细胞中均有表达；bFGFsiRNA表达质粒稳定转染LEC—B3细胞后，其bFGF基因和蛋白表达降低，实验组PCNA表达明显降低，和对照组相比差异具有统计学意义（t=-5．0011，P=0．0005）。结论LEC-B3细胞组成性表达bFGF和FGFR1的mRNA；干扰bFGF基因表达可有效抑制LEC-B3细胞增殖。

主 题 词：成纤维细胞生长因子2 质粒 RNA,小分子干扰 白内障 上皮细胞 细胞增殖 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0412-4081.2008.12.006

馆 藏 号：203825166...