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人亲环素A基因克隆及在大肠杆菌中表达

人亲环素A基因克隆及在大肠杆菌中表达

作     者:李芳秋 赵权 武建国 单祥年 Li Fangqiu,Zhao Quan,Wu Jianguo et al L aboratory of Molecular Biology,Center of Medical L aboratory Sciences of PL A, Jinling H ospital(Nanjing,2 1 0 0 0 2 )

作者机构:南京师范大学生物系 南京军区南京总医院解放军医学检验中心南京210002 

出 版 物:《医学研究生学报》 (Journal of Medical Postgraduates)

年 卷 期:1997年第10卷第4期

页      码:307-311页

摘      要:目的 :用基因重组技术表达人亲环素 A( Cy PA) ,以避免从人组织材料中提取纯化该蛋白的麻烦。  方法 :应用反转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)技术从人淋巴细胞系 ( MT4 )总 RNA中扩增得到 Cy PA基因片段 ,并用重组 DNA技术对该基因片段进行克隆 ,构建表达载体 ,转入大肠杆菌进行表达。  结果 :DNA序列分析表明 ,得到的基因片段与设计编码 Cy PA的结构基因序列完全相同。所构建的表达载体 p ET11/Cy PA转入大肠杆菌获得表达 ,重组蛋白表达量占菌体可溶性蛋白的 4 1% ,经测定具有肽基脯氨酸顺 /反异构酶活性。  结论 :利用基因重组技术使大肠杆菌高效表达出有生物活性的人 Cy PA。

主 题 词:亲环素A 基因克隆 序列分析 基因表达 肽基脯氨酸顺/反异构酶 

学科分类:1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D O I:10.16571/j.cnki.1008-8199.1997.04.006

馆 藏 号:203826567...

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