LDR法检测HBVP基因区野生型和突变型片段

作     者：赵建华 吴月平 毛丽萍 陆建荣 陈琳 陆仁飞 

作者机构：南通市第三人民医院江苏226006 

出 版 物：《齐齐哈尔医学院学报》 (Journal of Qiqihar Medical University)

年 卷 期：2012年第33卷第8期

页      码：994-996页

摘      要：目的探讨连接酶检测反应(LDR)方法同时检测HBV P基因区野生型和突变型片段的可行性。方法针对拉米夫定、替比夫定、阿德福韦和恩替卡韦8个耐药位点上的氨基酸替换形式,设计15对特异性引物,采用多重PCR扩增HBV P基因区野生型和突变型目的片段,然后进行多重LDR,最后在ABI3130测序仪上电泳,根据内参标记、LDR产物的长度进行结果判读。应用此方法对12例慢性HBV感染患者血清进行检测,焦磷酸测序技术对其验证,判断其特异性和准确性。结果 LDR法能有效区分包括rtL180M、YMDD、YIDD、YVDD、rtA181V/T、rtN236T、rtT184G、rtS202I、rtM250V野生株和部分突变株;4例HBVDNA大于106copies/ml患者检测出野生株和突变株,结果与焦磷酸测序一致。结论血清HBVDNA大于106copies/ml时结合多重PCR的复合LDR可通过一次扩增检测产物中的多个单突变或野生型位点,有助于核苷(酸)类似物耐药的诊断和治疗。

主 题 词：乙型肝炎病毒 连接酶检测反应 突变型 野生型 

学科分类：1007[医学-药学类] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-1256.2012.08.007

馆 藏 号：203826863...