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实时荧光定量PCR检测沙眼衣原体的研究

实时荧光定量PCR检测沙眼衣原体的研究

作     者:陆中奎 

作者机构:佛山市顺德区龙江镇龙江医院检验科广东佛山528318 

出 版 物:《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期:2013年第13卷第6期

页      码:752-755,F0003页

摘      要:目的采用TaqMan探针建立检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法。方法根据沙眼衣原体外膜蛋白A的基因(ompA)序列设计引物和探针,以克隆的ompA部分基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量检测方法。结果建立的荧光定量PCR检测方法的最低检出限为5 copies/反应,检测线性范围100~107线性关系良好(r2=0.997),比巢式PCR敏感100倍;且与鹦鹉热衣原体、淋球菌、解脲脲原体、大肠杆菌等病原菌DNA以及人基因组DNA均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。以巢式PCR作参比,建立的荧光定量PCR法检测沙眼衣原体的阳性符合率为100.00%,阴性符合率为95.09%,总符合率为96.81%。结论建立的检测沙眼衣原体实时荧光定量PCR具有特异性强和敏感性高的特点,可快速检测样本中微量沙眼衣原体DNA,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选。

主 题 词:沙眼衣原体 实时定量PCR 外膜蛋白A 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

馆 藏 号:203827338...

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