抗前列腺特异抗原单链抗体/人羧肽酶A融合基因的构建及表达

作     者：武国军 郝晓柯 白玉杰 张盈华 王禾 药立波 季少平 李福洋 WU Guo-Jun;HAO Xiao-Ke;BAI Yu-Jie;ZHANG Ying-Hua;WANG He;YAO Li-Bo;JI Shao-Ping;LI Fu-Yang

作者机构：第四军医大学唐都医院中心实验室陕西西安710038 第四军医大学 西京医院泌尿外科 

基　　金：全军重点实验室基金课题!(1997-71-22) 

出 版 物：《第四军医大学学报》 (Journal of the Fourth Military Medical University)

年 卷 期：2000年第21卷第4期

页      码：391-393页

摘      要：目的　构建抗前列腺特异抗原 (PSA)单链抗体(sc Fv) /人羧肽酶 A(h CPA)融合基因 ,为前列腺癌的抗体导向酶 -前体药物疗法奠定基础 .方法　在已克隆抗 PSA sc Fv和 h CPA基因的基础上 ,用加端 PCR分别在 sc Fv基因的 3′端和 h CPA基因的 5′端加上部分连接肽 (linker)基因序列 ,回收后混合 ;应用重叠延伸拼接法 ,将抗 PSA sc Fv基因和 h CPA基因通过 linker序列串联为 sc Fv/h CPA融合基因 ;并将构建的融合基因克隆到融合表达载体 p GEX- 4T- 1中进行表达 .结果　序列测定结果表明 ,构建的抗 PSA sc Fv/h CPA融合基因中 sc Fv和 h CPA序列均正确 ,sc Fv和 h CPA间有 18bp的linker序列 ,推导的氨基酸序列为 GSGGSG,与设计的序列相符 .融合基因经 IPTG诱导表达重组蛋白并以 SDS- PAGE分析 ,在 Mr为 940 0 0左右出现一条新生蛋白带 ,表达量约占菌体总蛋白的 34% .结论　成功构建并原核表达了抗 PSAsc Fv/h

主 题 词：单链抗体 羧肽酶A 融合基因 前列腺肿瘤 抗前列腺特异抗原 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100102[100102] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-2790.2000.04.001

馆 藏 号：203827768...