罗非鱼源无乳链球菌溶血素基因体外表达及其免疫原性

作     者：王蓓 李桂欢 王培 汤菊芬 鲁义善 吴灶和 简纪常 WANG Bei;LI Guihuan;WANG Pei;TANG Jufen;LU Yishan;WU Zaohe;JIAN Jichang

作者机构：广东海洋大学水产学院湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室湛江524088 广东省水产经济动物病害控制重点实验室湛江524088 仲恺农业工程学院广州510225 

基　　金：国家自然科学基金青年基金(31302226) 国家科技支撑计划项目(2012BAD17B02 2012BAD17B03) 广东省科技计划农业攻关项目(2012B020308009) 广东省2012年鱼病防治专项资金(2130108)共同资助 

出 版 物：《渔业科学进展》 (Progress in Fishery Sciences)

年 卷 期：2014年第35卷第6期

页      码：60-67页

摘      要：为研究罗非鱼源无乳链球菌溶血素(Hemolysin,Hly)对鱼体的免疫保护作用,根据已获得的无乳链球菌ZQ0910全基因组序列设计引物扩增hly基因,定向克隆于原核表达载体p ET-28a中,构建原核重组质粒p ET-28a-hly,经IPTG诱导表达后,制成亚单位疫苗免疫吉富罗非鱼,并分析疫苗的免疫保护力。结果显示,hly基因产物大小1335 bp,编码444个氨基酸,经测序与Gen Bank报道的链球菌属Hly氨基酸序列同源性可达99%。经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析可见一条51.7 k D的特异条带;Western blotting分析结果说明表达的Hly蛋白能与His-Tag单抗特异性结合;制备的亚单位疫苗免疫鱼体后第14天即可检测到抗体产生,并在第28天达到峰值,抗体效价为1∶4096,免疫保护率为70%。由此证实,该亚单位疫苗有望成为预防由无乳链球菌引起的罗非鱼链球菌病的基因工程类疫苗。

主 题 词：无乳链球菌 溶血素 原核表达 免疫原性 

学科分类：0908[0908] 09[农学] 

D　O　I：10.11758/yykxjz.20140609

馆 藏 号：203828105...