猫肉瘤相关蛋白对前列腺癌细胞周期及凋亡的影响及其机制

作     者：胡旭东 于德新 张志强 谢栋栋 王毅 张涛 Hu Xudong;Yu Dexin;Zhang Zhiqiang;Xie Dongdong;Wang Yi;Zhang Tao

作者机构：安徽医科大学第二附属医院泌尿外科合肥230601 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2015年第32卷第6期

页      码：1288-1290页

摘      要：目的 探讨小RNA干扰技术（siRNA）沉默猫肉瘤相关蛋白（Fer）的表达对前列腺癌细胞周期及凋亡的影响及其机制.方法 设计合成3组针对Fer特异的siRNA转染人前列腺癌PC-3细胞,应用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot法检测转染前后PC-3细胞中Fer mRNA及蛋白表达水平,并筛选出干扰效率最高的小干扰RNA进行后续实验,用流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期变化并分析细胞凋亡,观察Fer基因表达抑制后细胞周期及凋亡相关基因表达水平的变化.结果 利用RT-qPCR检测siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3组的Fer mRNA相对表达量分别为0.288、0.369、0.623,与阴性对照（NC）组比较差异均具有统计学意义（以NC组FermRNA表达量为l,P＜0.05）,Western blot方法同样证实3组小RNA干扰组显著抑制PC-3细胞的Fer蛋白的表达,其中siRNA-1干扰效率最高（P＜0.01）.流式细胞仪结果显示RNA干扰（Si）组细胞G0/G1期细胞比例为（52.340±2.049）％,显著高于NC组（40.230±2.065）％,而在S期细胞比例为（35.040 ±3.810）％,显著低于NC组（50.650±3.693）％,两者与NC组比较差异均具有统计学意义（P＜0.05）;Si组细胞的凋亡率为（33.6±3.3）％,显著高于NC组的凋亡率（7.8±1.0）％,差异有统计学意义（P＜0.05）;同时随着Fer表达的抑制,细胞周期素（Cyclin） D1,B细胞淋巴瘤/白血病-2 （bcl-2）的表达显著下调,p21和活化型半胱氨酸-3的表达显著上升,与NC组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 Fer-siRNA可抑制Fer在前列腺癌细胞中的表达,抑制前列腺癌细胞G1/S期转化,从而诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与调控细胞周期及凋亡相关基因的表达有关.

主 题 词：前列腺癌 猫肉瘤相关蛋白 小干扰RNA 细胞周期 脱噬作用 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.06.027

馆 藏 号：203828277...