番茄果实ABA合成酶NCED基因的克隆及其RNAi遗传转化体系的建立

作     者：王玲 孙亮 冷平 王永军 徐丽哲 WANG Ling;SUN Liang;LENG Ping;WANG Yong-jun;XU Li-zhe

作者机构：中国农业大学农学与生物技术学院北京100193 北京市平谷区科学技术委员会北京100035 

基　　金：北京市科委重大资助项目(D0706002000091) 

出 版 物：《中国农业大学学报》 (Journal of China Agricultural University)

年 卷 期：2009年第14卷第5期

页      码：54-60页

摘      要：以番茄为材料,根据ABA合成关键酶编码基因NCED的保守序列设计引物,通过RT-PCR方法从番茄果实中克隆了2个NCED基因片段,Le NCED1和Le NCED2。通过农杆菌介导法进一步建立了‘嘉宝’番茄Le NCED1基因的RNAi再生和转化体系,并研究影响番茄遗传转化的4个因素外植体类型、预培养时间、激素组合、农杆菌侵染时间。结果表明:番茄子叶预培养2 d,用农杆菌LBA4404侵染5 min后,避光共培养2 d,在加入1mg/L 6-BA+0.05 mg/LIAA+5 mg/L潮霉素的MS培养基上可以诱导出芽,转入添加0.1 mg/LIAA+7 mg/L潮霉素的1/2 MS培养基上可以使芽生根。本实验共获得26株抗性植株。GUS染色证明,有9株抗性植株成功转入含有NCED基因RNAi载体的T-DNA,为深入了解ABA促进番茄果实成熟的机理提供了方法和材料。

主 题 词：番茄 NCED基因 ABA 再生 转化 RNAi 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1007-4333.2009.05.008

馆 藏 号：203833933...