抗栓肽基因的克隆和表达

作     者：劳兴珍 汤慧 吴国球 郑珩 LAO Xing-zhen;TANG Hui;WU Guo-qiu;ZHENG Heng

作者机构：中国药科大学生命科学与技术学院江苏南京210009 东南大学附属中大医院检验科江苏南京210009 

基　　金：中国药科大学青年教师基金资助项目 

出 版 物：《药物生物技术》 (Pharmaceutical Biotechnology)

年 卷 期：2006年第13卷第3期

页      码：174-177页

摘      要：抗栓肽(Decorsin)是糖蛋白Ⅱb-Ⅲa(GPⅡb-Ⅲa)的强拮抗剂,能抑制血小板聚集。实验通过设计两对引物,经PCR获得抗栓肽的结构基因,并将基因插入原核表达载体pET32a硫氧还蛋白(TrxA)的下游。将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),进行诱导表达,表达产物以可溶形式存在于胞内,占菌体总蛋白的35%。利用表达载体自身所带的His×6纯化标签,可将融合蛋白通过金属螯合亲和层析柱一步纯化,纯化的蛋白质经SDS-PAGE分析达到电泳纯。体外的抑制血小板聚集实验结果表明,融合蛋白具有显著的抑制ADP诱导的血小板聚集活性,抑制常数IC50为500 nmol/L。

主 题 词：抗栓肽 融合表达 抑制ADP诱导的血小板聚集活性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-8915.2006.03.004

馆 藏 号：203839849...