检测日本血吸虫感染性钉螺PCR方法的建立

作     者：陈军虎 闻礼永 张旭照 张剑锋 俞丽玲 洪林娣 CHEN Jun-hu;WEN Li-yong;ZHANG Xu-zhao;ZHANG Jian-feng;YU Li-ling;HONG Lin-di

作者机构：浙江省医学科学院寄生虫病研究所世界卫生组织蠕虫病研究合作中心杭州310013 浙江大学肿瘤研究所杭州310009 

基　　金：浙江省医药卫生科学研究基金(No.2004B001)~~ 

出 版 物：《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 (Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases)

年 卷 期：2006年第24卷第3期

页      码：204-207页

摘      要：目的建立灵敏、特异的检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。方法根据日本血吸虫18S小亚基单位核糖体核酸(18S-rRNA)基因设计1对引物,建立检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法。测定PCR产物的DNA序列,稀释血吸虫毛蚴DNA进行PCR方法的灵敏性试验,扩增单尾尾蚴感染的钉螺DNA进行交叉反应试验,并根据不同稀释度的感染性钉螺DNA的扩增结果来验证PCR的群体检测效果。结果PCR扩增日本血吸虫感染性钉螺,得到了与靶DNA片段位置相同的产物,测序片段长度为469bp,与靶DNA相同且序列一致,并将序列登录GenBank(注册号:DQ442999)。扩增阴性钉螺无产物出现。灵敏性试验提示,PCR可检出日本血吸虫毛蚴DNA的最低浓度为40pg/μl;交叉反应试验显示,PCR方法不能扩增出单尾尾蚴感染钉螺的DNA;群体检测试验表明,PCR可检出感染性钉螺提取的DNA最高稀释度为1∶640。结论初步建立的检测日本血吸虫感染性钉螺的PCR方法灵敏、特异且具有良好的群体检测效果。

主 题 词：日本血吸虫 湖北钉螺 聚合酶链反应 18S小亚基单位核塘体核酸基因 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 1010[医学-医学技术类] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-7423.2006.03.011

馆 藏 号：203839865...