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用PCR法检测苏云金杆菌的溶原性噬菌体

用PCR法检测苏云金杆菌的溶原性噬菌体

作     者:廖威 宋少云 陈维春 薛清华 孙钒 艾云灿 庞义 LIAO Wei;SONG Shao-yun;CHEN Wei-chun;XUE Qing-hua;SUN Fan;AI Yun-can;PANG Yi

作者机构:中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室 

基  金:"十五"国家科技攻关计划资助项目(2001BA708B07-03) 

出 版 物:《中山大学学报(自然科学版)》 (Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni)

年 卷 期:2006年第45卷第4期

页      码:79-82页

摘      要:根据苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,B.t)溶原性噬菌体G IL01(GenBank Accession Number:AJ536703)的同源序列设计一对引物,用35株B.t标准菌株和生产菌株MZ1(血清型H3 a3b)的过夜培养物作模板,结果有16株菌株包括MZ1能扩增出大小约为750 bp的预期产物,推测这16株菌为溶原菌。MZ1菌株的过夜培养液与指示菌ZK1(血清型H25)混匀并在双层琼脂上培养12 h后出现了滴度为2×107pfu的噬菌斑,从而证明生产菌株MZ1确为溶原菌;又以G IL01同源性较高的其它四个基因设计引物,分别以MZ1的培养物及其溶原性噬菌体基因组为模板进行PCR扩增,结果两者得到几乎一致的带型,进一步证明了生产菌株MZ1为溶原菌,说明利用PCR法检测鉴定苏云金杆菌的溶原性是可行的。比较指示菌方法、直接电镜法和DNA鉴定法,PCR法快速简便,对B.t生产上快速检测其溶原性噬菌体有实用意义。

主 题 词:苏云金杆菌 溶原性 噬菌体 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 071010[071010] 100705[100705] 07[理学] 071005[071005] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:0529-6579.2006.04.019

馆 藏 号:203839904...

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