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小分子干扰RNA抑制Survivin基因表达诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的研究

小分子干扰RNA抑制Survivin基因表达诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的研究

作     者:马静 李晓江 刘流 赵留芳 杨洁 孙瑞梅 隋军 MA Jing;LI Xiao-jiang;LIU Liu;ZHAO Liu-fang;YANG Jie;SUN Rui-mei;SUI Jun

作者机构:昆明医学院第三附属医院头颈外科650118 昆明医学院第一附属医院整形外科 

出 版 物:《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期:2011年第28卷第8期

页      码:1280-1282页

摘      要:目的观察应用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中Survivin表达对细胞凋亡和细胞增殖的影响。方法设计、合成特异性抑制Survivin表达的siRNA,转染瘢痕疙瘩成纤维细胞,通过半定量逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)及Western blot检测24h和48h后成纤维细胞内Survivin mRNA和蛋白变化,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,噻唑蓝(MTF)测定成纤维细胞的增殖。结果重组质粒成功转染瘢痕成纤维细胞,转染效率为67.0%;阳性质粒转染24h后,Survivin mRNA和蛋白表达明显降低,抑制率分别为52.2%和54.8%(P〈0.05),48h后抑制率增至75.7%和76.7%。阳性质粒转染24h凋亡率为11.9%,48h增加至21.2%,显著高于阴性对照组和未处理组;细胞周期检测阳性质粒干扰组s期细胞减少,G2/M期所占比例增高,出现了G2/M期阻滞现象;MTF测定阳性质粒干扰组细胞生长曲线平缓。结论特异性siRNA可以有效干扰瘢痕疙瘩成纤维细胞内Survivin mRNA和蛋白的表达,诱导细胞的凋亡和抑制细胞的增殖。

主 题 词:瘢痕疙瘩 RNA干扰 Survivin基因 基因疗法 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2011.08.028

馆 藏 号:203841783...

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