杂合抗菌肽HMCM的原核表达及其活性鉴定

作     者：胡功铃 陈国平 胡宗利 李勇 赵志平 

作者机构：重庆大学生物工程学院重庆400044 四川理工学院化学与制药工程学院四川自贡643000 

基　　金：重庆市攻关项目(CSTC 2009AB5174) 中央高校基本科研业务项目(CDJXS1023) 

出 版 物：《药物生物技术》 (Pharmaceutical Biotechnology)

年 卷 期：2012年第19卷第1期

页      码：6-10页

摘      要：将哺乳动物抗菌肽(Hexapeptide)、两栖类抗菌肽(Magainin)、昆虫抗菌肽(Cecropin A和Melittin)的有效作用部分拼接在一起,以获得一种新型的杂合抗菌肽HMCM。根据HMCM氨基酸序列和大肠杆菌B细胞的密码子偏好性设计了HMCM的基因序列;将目的基因克隆到原核表达载体pET-32a-c(+),构建了重组表达载体pET-32a-HMCM;再转化原核表达菌株*** BL21(DE3)实现融合表达,通过摸索诱导时间、IPTG浓度、OD600和温度等条件确定了表达最佳条件,并确定了融合蛋白以可溶形式存在;通过亲和层析纯化了融合蛋白,并进行了Western-blotting鉴定;最后用EK酶酶切融合蛋白释放出HMCM,对HMCM的抗菌性进行了初步研究。结果表明HMCM对枯草芽孢杆菌有良好的抑菌作用。

主 题 词：抗菌肽 大肠杆菌 融合表达 抗菌活性 

学科分类：071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 090102[090102] 0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1007[医学-药学类] 1001[医学-基础医学] 0817[工学-轻工类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 

D　O　I：10.19526/j.cnki.1005-8915.2012.01.002

馆 藏 号：203842151...