大鼠锌指蛋白ZFP580的原核表达与分离纯化

作     者：牟心红 李海生 梁林 张文成 MU Xin-hong;LI Hai-sheng;LIANG Lin;ZHANG Wen-cheng

作者机构：武警后勤学院分析实验中心天津300162 武警后勤学院生理学与病理生理学教研室天津300162 武警后勤学院科研部天津300162 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81170106) 天津市应用基础研究计划项目(10JCYBJC26500) 武警后勤学院院级面上项目(WYM201103) 

出 版 物：《武警医学院学报》 (Acta Academiae Medicinae CPAPF)

年 卷 期：2012年第21卷第6期

页      码：405-407页

摘      要：【目的】构建ZFP580基因的原核表达质粒,转化大肠杆菌,诱导表达并分离纯化大鼠锌指蛋白ZFP580。【方法】根据ZFP580 cDNA序列的开放阅读框设计引物,利用PCR技术扩增ZFP580的开放阅读框cDNA序列,将PCR扩增的目的片段与载体pET30a分别双酶切、回收纯化后做定向连接,Nco I、Xho I双酶切电泳筛选、鉴定并测序。将构建的重组质粒pET30a-ZFP580转化大肠杆菌BL21(DE3),由异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化目的蛋白。【结果】成功扩增ZFP580基因并构建了表达质粒pET30a-ZFP580,测序结果表明与GeneBank公布的序列一致。含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达后,产物蛋白分子量约为19 kDa。【结论】成功表达并纯化了大鼠ZFP580蛋白,为进一步研究锌指蛋白ZFP580的功能奠定了基础。

主 题 词：锌指蛋白580 原核表达 SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-3720.2012.06.003

馆 藏 号：203842285...