非洲马瘟病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者：赵文华 杨仕标 李富祥 

作者机构：云南省畜牧兽医科学院国家外来动物疫病诊断实验室云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室云南昆明650224 

基　　金：公益性行业(农业)科研专项(200903037) 云南省应用基础研究项目(2009ZC182M) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2013年第43卷第11期

页      码：1167-1174页

摘      要：为建立非洲马瘟病毒(AHSV)TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank及自己所测的AHSV 9个血清型VP7的ORF全长核苷酸序列,设计2套位于AHSV基因组S7片段的特异引物及相应TaqMan探针。经试验,结果证实2套引物探针可将9种血清型的AHSV RNA分为2群而分别进行特异性检测,而对与AHSV同属的蓝舌病病毒、鹿出血热病毒及正常马淋巴组织均无荧光信号可检出。其中探针H2及其配套引物可特异性检测AHSV1、3、4、6、7、8、9七个血清型,而MGB探针及其配套引物可特异性检测AHSV 2、5两个血清型。分别以构建好的2型、9型全长VP7的pMD18-T-VP7质粒为标准品建立标准曲线,最终建立了AHSV TaqMan荧光探针实时荧光定量RT-PCR快速检测方法,可实现对全部9个血清型AHSV的定量检测和快速诊断。

主 题 词：非洲马瘟病毒 TaqMan探针 实时荧光定量RT—PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2013.11.008

馆 藏 号：203842898...