猪清道夫受体SRA/CD204多克隆抗体的制备以及该受体介导的细菌吞噬功能分析

作     者：黎倩倩 张彦兵 相笑 魏建超 齐鹏飞 石元元 陆莹梅 夏鹏 刘珂 邵东华 李蓓蓓 马志永 孙延鸣 邱亚峰 

作者机构：石河子大学动物科技学院石河子832003 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 

基　　金：中国农业科学院上海兽医研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2014JB06) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2015年第23卷第6期

页      码：42-47页

摘      要：针对猪SRA/CD204胞外区对应的基因片段（614～1324 bp）进行引物设计,PCR扩增获得目的片段并克隆至原核表达载体p ET-28a中,构建重组表达质粒p ET-SRA-c。利用原核表达系统获得高效表达于包涵体中的重组蛋白r SRA-c（约32 k Da）,利用亲和层析技术获得纯化的r SRA-c。利用纯化的r SRA-c为免疫原,免疫Balb/c小鼠（100μg/小鼠）,制备多抗血清。经Western blot结果显示,该多抗血清不仅可以识别r SRA-c,而且可以识别真核表达的全长的猪SRA/CD204（约55 k Da）。免疫荧光分析表明该多抗血清可以清楚地识别表达于CHO细胞膜上的SRA/CD204。最后,利用表达猪SRA/CD204的CHO细胞,对其介导的细菌吞噬功能进行了研究,结果表明猪SRA/CD204可以有效地介导大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的吞噬。本研究为进一步研究猪SRA/CD204在病原微生物感染中的作用奠定了基础。

主 题 词：清道夫受体 重组蛋白 多克隆抗体 细菌 吞噬 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-6422.2015.06.008

馆 藏 号：203844029...