17-AAG对人RPE细胞PDGFR和EGFR基因表达的调控

作     者：许志洋 姚家奇 刘庆淮 李建民 王强 Zhi-Yang Xu;Jia-Qi Yao;Qing-Huai Liu;Jian-Min Li;Qiang Wang

作者机构：南京医科大学中心实验室210029 南京医科大学附属医院常州第二医院消化内科中国江苏省南京市213003 南京医科大学一附院眼科中国江苏省南京市210029 南京医科大学细胞生物学系210029 

出 版 物：《国际眼科杂志》 (International Eye Science)

年 卷 期：2008年第8卷第12期

页      码：2431-2434页

摘      要：目的:通过检测17-AAG对人RPE细胞不同处理条件下mRNA的SYBR Green实时PCR方法,观察17-AAG对人RPE细胞中PDGFR和EGFR基因表达的调控。方法:体外培养人RPE细胞株。当加入17-AAG并作用0,2,5,10μmol/L及0,16,24,48h后,收集细胞,抽提RNA进行反转录。同时根据PDGFR、EGFR的基因序列,设计PDGFR、EGFR的引物,利用ABI7300PCR仪和SYBR Green,建立实时荧光PCR反应条件,通过比较Ct值进行基因表达的相对定量分析。结果:熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳结果证明了PCR反应的特异性;相对定量结果显示,17-AAG可以下调PDGFR基因的表达(P<0.05),上调EGFR基因表达(P<0.05)。结论:SYBR Green实时荧光PCR可特异、准确地分析RPE细胞相关增殖基因表达差异,为系统研究17-AAG治疗PVR的复杂调控机制创造有力条件。

主 题 词：SYBR Green 实时荧光PCR 17-AAG 视网膜色素上皮细胞 增生性玻璃体视网膜病变 热休克蛋白90 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100212[100212] 10[医学] 

馆 藏 号：203848383...