玉米APX基因的克隆及其原核表达研究

作     者：任瑛 赵美爱 郭新梅 裴玉贺 宋希云 REN Ying;ZHAO Mei-ai;GUO Xin-mei;PEI Yu-he;SONG Xi-yun

作者机构：青岛农业大学生命科学学院山东青岛266109 青岛农业大学青岛市主要农作物种质创新与应用重点实验室山东青岛266109 青岛农业大学农学与植物保护学院山东青岛266109 

基　　金：青岛市公共领域科技支撑计划项目(12-1-3-15-nsh) 国家自然科学基金项目(31371636) 山东省农业生物资源创新利用研究课题项目 山东省现代农业产业技术体系玉米产业创新团队项目(SDAIT-01-022-01) 

出 版 物：《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期：2014年第29卷第4期

页      码：49-55页

摘      要：为了研究冷胁迫处理下的玉米抗坏血酸过氧化物酶的作用,根据GenBank发表的APX基因的ORF序列设计引物,利用RT-PCR从冷胁迫后的玉米自交系(E28)叶片总RNA中经cDNA转化,pMD19-T载体的亚克隆,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个氨基酸残基。生物信息学分析显示,APX相对分子质量和理论等电点依次为27.3 kDa和5.56。将携带完整的ORF序列连入表达载体pET-28a(+)中,APX基因经IPTG诱导后高效表达,SDS-PAGE电泳检测到目标蛋白的大小约为27.3 kDa,与预测结果一致。抗盐分析显示,重组大肠杆菌BL21(pET28-APX)的抗盐性明显高于对照菌株BL21(pET28)且其抗NaCl的临界浓度为0.6 mol/L,这为后期对作物的抗逆研究提供了科学依据。

主 题 词：APX 原核表达 pET28a(+) IPTG BL21(DE3) 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

馆 藏 号：203848538...