染色体16三体人胚胎干细胞系的建立

作     者：招霞 孙海翔 胡娅莉 Zhao Xia;Sun Hai-xiang;Hu Ya-li

作者机构：南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心江苏省南京市210008 

基　　金：南京市科技局社会发展重大项目资助 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2009年第13卷第6期

页      码：1011-1016页

摘      要：背景:研究显示部分人胚胎干细胞系在建系或体外培养过程中出现染色体异常的现象,建立染色体异常的人胚胎干细胞系,可分析染色体对人胚胎干细胞特性的影响。目的:拟建立染色体异常的人胚胎干细胞系。设计、时间及地点:细胞学体内外观察,于2006-10/2008-02在南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心完成。材料:冷冻人胚胎由南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心提供,4周龄NOD-scid鼠1只及ICR胎鼠成纤维细胞由南京大学医学院附属鼓楼医院实验动物中心提供。方法:将人冷冻胚胎解冻后,置于囊胚培养基中微滴培养,胚胎发育至扩张囊胚期时分离囊胚中的内细胞团,以ICR胎鼠成纤维细胞作为饲养层,机械法传代,建立的人胚胎干细胞系命名为NJGLChES2。主要观察指标:对10代以后的细胞进行核型分析,选择核型异常的人胚胎干细胞系鉴定其碱性磷酸酶和特异性标记物的表达,通过体外类胚体形成实验及体内畸胎瘤成瘤实验观察其分化能力。结果:NJGLChES2人胚胎干细胞系核型分析结果呈16号染色体三体(47,XX,+16),呈人胚胎干细胞克隆样生长,碱性磷酸酶和胚胎特异性标记物OCT-4,SSEA-3,SSEA-4,TRA-1-60,TRA-1-81的表达均为阳性。体外悬浮培养的NJGLChES2人胚胎干细胞可形成囊状拟胚体,体内接种至NOD-scid鼠腹股沟皮下后在接种部位可形成畸胎瘤,肿瘤组织含有来源于鳞状上皮、横纹肌和呼吸道黏膜上皮3个胚层的多种细胞类型。结论:成功建立16号染色体三体人胚胎干细胞系NJGLChES2,可长期稳定增殖并保持未分化状态,且在体内外具有多向分化潜能。

主 题 词：胚胎干细胞 核型分析 染色体畸变 16号染色体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1007[医学-药学类] 0403[0403] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 1010[医学-医学技术类] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0836[0836] 

馆 藏 号：203850079...