人鼠同源Ⅰ型胶原siRNA及表达载体的构建

作     者：李欣欣 周春华 于海 赵海丹 LI Xin-xin;ZHOU Chun-hua;YU Hai;ZHA Hai-dan

作者机构：海军总医院肾内科北京100037 

基　　金：北京市自然科学基金(7063094) 

出 版 物：《中国现代医学杂志》 (China Journal of Modern Medicine)

年 卷 期：2008年第18卷第21期

页      码：3100-3102,3106页

摘      要：目的针对I型胶原α1(I)链设计、构建人鼠同源的Ⅰ型胶原siRNA(COL1A1-siRNA)及其表达载体,并证实其有效性。方法利用软件设计人鼠完全同源的一对Ⅰ型胶原siRNA序列,并构建其表达载体。直接将I型胶原siRNA和构建的质粒转染至大鼠系膜细胞,利用RT-PCR方法观察对系膜细胞I型胶原蛋白表达的抑制作用。结果Ⅰ型胶原siRNA转染至大鼠系膜细胞后,与空白对照组及MOCK组比较,能够抑制Ⅰ型胶原的表达。其质粒对Ⅰ型胶原表达的抑制作用更加显著,呈剂量依赖性。结论所设计的Ⅰ型胶原siRNA为人与大鼠完全同源的siRNA序列,所有碱基完全匹配。可以成功转染到大鼠系膜细胞,并有效抑制I型胶原在细胞内的表达。质粒载体的方法同样能够抑制Ⅰ型胶原的形成,而且表达更稳定,作用更显著。

主 题 词：RNA干涉 肾脏纤维化 Ⅰ型胶原 

学科分类：10[医学] 

馆 藏 号：203850883...