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卵圆细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞

卵圆细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞

作     者:缴富斌 张波 孙晓艳 罗军 季建华 Jiao Fu-bin;Zhang Bo;Sun Xiao-yan;Luo Jun;Ji Jian-hua

作者机构:解放军军医进修学院北京市100853 解放军总参警卫局保健处北京市100017 解放军总医院基础医学研究部北京市100853 

基  金:国家自然科学基金(2004B34001007)~~ 

出 版 物:《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期:2008年第12卷第21期

页      码:4007-4011页

摘      要:背景:原代分离的肝卵圆细胞具有双向分化的能力和横向分化的可塑性。目的:分离大鼠肝脏卵圆细胞,在化学诱导剂作用下使其定向分化为胰岛素分泌细胞。设计、时间及地点:对照观察细胞实验,于2007-05/2008-01在解放军总医院基础研究部,国家重点实验室完成。材料:SPF级SD大鼠,体质量(120±20)g。方法:采用改良梯度离心法分离、培养大鼠肝卵圆细胞,并行免疫组织化学鉴定。随后将卵圆细胞置于含有诱导剂Nicotimide和高浓度葡萄糖的RPMI1640培养液继续培养,同时以不含诱导剂的RPMI1640培养液培养的卵圆细胞作为阴性对照。主要观察指标:采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联免疫吸附实验、放射免疫分析检测两组卵圆细胞胰岛素的表达。结果:改良的梯度离心方法分离的细胞具干细胞特点,可形成集落,并且OV6、CD34、Nestin染色呈阳性。分离的大鼠肝卵圆细胞,加入诱导剂Nicotimide和高浓度葡萄糖诱导培养1周后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联免疫吸附、RIA检测均显示胰岛素分泌量远高于不含诱导剂细胞(P<0.05)。结论:化学诱导剂Nicotimide和高浓度葡萄糖可以在短时期内作用肝卵圆细胞可启动胰十二指肠同源盒基因-l基因,使之定向分化为胰岛素分泌细胞。

主 题 词:肝脏干细胞 卵圆细胞 PDX-1 梯度离心 RIA 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1007[医学-药学类] 0403[0403] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 1010[医学-医学技术类] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0836[0836] 

D O I:10.3321/j.issn:1673-8225.2008.21.031

馆 藏 号:203855847...

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