套式聚合酶链式反应诊断恶性疟原虫及混合感染的研究

作     者：诸欣平 刘强 周蕾 姜洪杰 牛春 陈沛泉 

作者机构：首都医科大学 广州中医药大学 

基　　金：美国中华医学基金 北京市教委科技发展基金 

出 版 物：《中国寄生虫病防治杂志》 (Chinese Journal of Parasitic Disease Control)

年 卷 期：1999年第12卷第1期

页      码：16-19页

摘      要：为了建立一种特异、敏感、简便的疟疾诊断方法，设计并合成两对针对恶性疟原虫（Ｐ．ｆ．）小亚单位核糖体核糖核酸（ＳＳＵｒＲＮＡ）基因特异的引物，采用套式聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术，扩增恶性疟原虫ＳＳＵｒＲＮＡ基因特定片段。利用该系统诊断云南及海南疟疾患者血样，并随机选取扩增产物进行克隆测序鉴定。结果显示，恶性疟原虫模板均扩增出长度为２０５ｂｐ的特定基因片段，经Ｔ－载体克隆测序与恶性疟原虫ＳＳＵｒＲＮＡ特定基因片段序列完全符合。该系统特异性强，除恶性疟原虫外，间日疟原虫（Ｐ．ｖ．）、三日疟原虫（Ｐ．ｍ．）、卵形疟原虫（Ｐ．ｏ．）、正常人血ＤＮＡ样本及空白对照均无此扩增带出现。该系统检测原虫的敏感度为１．５个原虫／μｌ，大大高于常规镜检。６１份Ｐ．ｆ．镜检阳性标本在进行ＰＣＲ检测时亦均呈阳性，同时联合应用套式ＰＣＲ扩增间日疟原虫ＳＳＵｒＲＮＡ特定基因片段的检测系统，发现６１例恶性疟病人中２３例是Ｐ．ｆ．和Ｐ．ｖ．混合感染。该检测系统具有特异、敏感、稳定、简便的特点，对疟疾的诊断。

主 题 词：恶性疟原虫 SSUrRNA PCR 混合感染 诊断 疟疾 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

馆 藏 号：203856752...