猪瘟病毒野生株和疫苗株荧光RT-PCR鉴别方法的建立

作     者：余以刚 黄韵 陶文扬 章丽 吴晖 肖性龙 赖富饶 杨锡洪 

作者机构：华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640 广东温氏佳润食品有限公司广东云浮527400 

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金资助项目(31101279) 教育部高等学校博士学科点专项科研基金新教师类资助课题(20110172120034) 广东省科技计划资助项目(2011B020314004) 广东省省部产学研结合项目(2012B091100113) 广东省天然产物绿色加工与产品安全重点实验室开放课题(201101) 

出 版 物：《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期：2013年第29卷第8期

页      码：1978-1983页

摘      要：为了建立猪瘟病毒野生株和疫苗株荧光RT-PCR鉴别方法,设计了1对通用引物和2条特异性MGB探针。此外,为防止假阴性结果出现,制备了假病毒用于全程检测监控。测试了本方法的特异性,灵敏度,重复性等技术指标。结果显示,在选定的猪病相关病毒组内特异性符合率达100%;对野毒株和疫苗株的检测灵敏度分别达到1TCID50/mL和0.1 TCID50/mL;重复性实验表明组内和组间变异系数均在0.7-2.2%之间。临床比对试验结果显示,荧光RT-PCR对猪肉、脾脏和血液病料进行猪瘟野毒检测的阳性率分别为66.7%、60.0%、77.8%,而传统方法的阳性率分别为52.4%、40.0%、50.0%;检出率比传统方法要高。此外,临床试验样本中,PCR抑制物在猪肉、脾脏和血液病料中存在的比例分别为9.5%、10.0%和5.6%,显示了假病毒作为内标对PCR检测监控的重要作用。

主 题 词：猪瘟病毒 猪瘟弱毒疫苗株 荧光RT-PCR 假病毒 检测 荧光 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.13982/j.mfst.1673-9078.2013.08.011

馆 藏 号：203858266...