猪背最长肌PFK-2/FBPase-2荧光定量RT-PCR方法的建立

作     者：李朋颖 汤晓艳 王敏 康大成 颜成英 LI Peng-ying;TANG Xiao-yan;WANG Min;KANG Da-cheng;YAN Cheng-ying

作者机构：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 农业部农产品质量安全重点实验室北京100081 

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金项目(31000799) “十二五”国家科技支撑计划项目(2012BAD28B03) 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2014年第35卷第14期

页      码：113-117页

摘      要：为研究糖酵解关键酶果糖-6-磷酸-2激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase,PFK-2/FBPase-2)基因转录水平与宰后肉品质间的关系,根据猪PFK-2/FBPase-2 mRNA序列(GenBank登录号:NM_001143721.1)设计一对特异性引物并选择β-actin作为内参基因,构建含有各自序列的重组质粒标准品,通过对反应条件的优化,建立了荧光定量实时-聚合酶链式反应技术检测猪PFK-2/FBPase-2基因转录水平的方法。结果表明,所建立的方法线性关系好,目的基因与内参基因R2均大于0.999;灵敏度高,两基因检出下限均为10拷贝/μL;特异性好,扩增产物均有特异性单一峰。同时根据标准曲线计算可知目的基因与内参基因的扩增效率分别为104.5%和104.0%,扩增效率接近一致,可对PFK-2/FBPase-2转录水平进行相对定量。本研究选取PSE肉产生程度不同的三元杂交猪、杜洛克猪和太湖猪,利用建立的方法对不同品种猪宰后45 min背最长肌中PFK-2/FBPase-2 mRNA转录水平进行测定,结果表明,太湖猪转录水平最高、杜洛克次之、三元杂交猪最低,且3个品种间有显著性差异(P<0.05)。

主 题 词：猪 PFK-2/FBPase-2 mRNA SYBR Green I 荧光定量实时-聚合酶链式反应 

学科分类：0832[0832] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 070302[070302] 0703[理学-化学类] 083203[083203] 

核心收录：

D　O　I：10.7506/spkx1002-6630-201414022

馆 藏 号：203859860...