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实时荧光环介导等温扩增技术检测乳粉中的肺炎克雷伯氏菌

实时荧光环介导等温扩增技术检测乳粉中的肺炎克雷伯氏菌

作     者:陈文秀 姜旋 马晓燕 张伟 CHEN Wen-xiu;JIANG Xuan;MA Xiao-yan;ZHANG Wei

作者机构:河北农业大学食品科技学院河北保定071000 

基  金:河北省自然科学基金项目(C2008000216) 

出 版 物:《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期:2014年第35卷第20期

页      码:192-197页

摘      要:为了建立食品中肺炎克雷伯氏菌灵敏快速的检测方法,根据GenBank中已公布的肺炎克雷伯氏菌phoE基因设计引物,利用实时荧光监测仪,建立实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术检测食品中肺炎克雷伯氏菌的方法,可直观判定检测结果,仪器亦可自动显示检测结果。对该检测方法的特异性、灵敏度等方面进行研究,并与聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法进行比较。结果表明,实时荧光LAMP检测方法特异性强、灵敏度高。用于特异性实验的21株实验菌株中,4株肺炎克雷伯氏菌,呈现阳性结果,而其他17株非肺炎克雷伯氏菌,均呈阴性结果;检测纯菌的灵敏度和检测人工污染乳粉的检出限分别为79 CFU/mL和79 CFU/g,是常规PCR检测方法的100倍。总之,本研究建立的实时荧光LAMP检测方法灵敏度高、特异性强、耗时短、结果判定直观,实现了对肺炎克雷伯氏菌的快速检测。

主 题 词:肺炎克雷伯氏菌 phoE基因 实时荧光环介导等温扩增 检测 SYBR GreenⅠ 

学科分类:0832[0832] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 070302[070302] 0703[理学-化学类] 083203[083203] 

核心收录:

D O I:10.7506/spkx1002-6630-201420038

馆 藏 号:203859860...

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