HB株*** AMA-1基因的克隆及免疫调节型真核表达载体构建

作     者：闫艳娟 李蕴玉 张东林 庞洪泽 张香斋 李佩国 YAN Yan-juan;LI Yun-yu;ZHANG Dong-lin;PANG Hong-ze;ZHANG Xiang-zhai;LIei-guo

作者机构：河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室 

基　　金：河北省现代农业产业技术体系蛋肉鸡产业创新团队岗位资助项目(HBCT2018150206) 2017年河北省硕士研究生创新资助项目(CXZZSS2017158) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2019年第39卷第11期

页      码：2173-2178页

摘      要：为研究HB株柔嫩艾美耳球虫(***)AMA-1基因的免疫原性,根据GenBank收录的AMA-1基因序列设计了1对引物,对HB株***的AMA-1基因进行克隆,应用生物信息学分析软件预测AMA-1基因的核苷酸及编码的蛋白质的结构和功能。连接pPIC9载体,并与细胞因子IL-2串联,构建真核表达载体pPIC9-IL-2-AMA-1,转化毕赤酵母细胞GS115,进行蛋白表达及纯化验证。结果显示,HB株*** AMA-1基因全长为1617bp,编码535个氨基酸,具有跨膜区及信号肽。经酶切和测序鉴定表明,真核表达载体pPIC9-IL-2-AMA-1构建成功。毕赤酵母转化结果表明,成功将重组载体转化到毕赤酵母中,PCR鉴定得到2200,2100bp 2条带。Western blot检测结果表明AMA-1在毕赤酵母中得到了很好的表达。本试验结果为AMA-1基因的功能和核酸疫苗的研制提供依据。

主 题 词：E.tenella HB株 AMA-1基因 真核表达载体 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.11.14

馆 藏 号：203860736...