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铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响

铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响

作     者:何银锋 张鹏 赵国阳 张林林 高超 沈光思 赵理平 张增利 林华 徐又佳 

作者机构:苏州大学附属第二医院骨科苏州215004 苏州大学公共卫生学院苏州215007 南京大学附属鼓楼医院骨科南京210008 

基  金:国家自然科学基金(81273090) 江苏省自然科学基金(BK2012608) 苏州市科技基础设施建设计划之高技术重点实验室资助项目(SZS2012208) 

出 版 物:《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 (Chinese Journal Of Osteoporosis And Bone Mineral Research)

年 卷 期:2013年第6卷第1期

页      码:37-43页

摘      要:目的了解铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响。方法 34℃条件下体外培养人成骨细胞(hFOB1.19),以不同浓度(50、100、200μmol/L)枸橼酸铁铵(FAC)干预,用RT-PCR检测成骨细胞铁调节基因膜转铁蛋白(FPN1)、转铁蛋白受体(TfR)和二价金属转运蛋白1(DMT1)表达的变化;用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察成骨细胞铁离子荧光强度;流式细胞仪检测成骨细胞活性氧(ROS)水平;碱性磷酸酶活性试剂盒检测碱性磷酸酶活性;Vonkossa染色法行钙结节染色。结果与对照组相比,FAC干预48h后FPN1mRNA的表达随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性上调,TfR、DMT1mRNA的表达呈剂量依赖性下调(P<0.05);FAC干预48h后成骨细胞铁离子荧光强度剂量依赖性减弱,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);48h后成骨细胞ROS水平随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性升高(P<0.05);FAC干预10d后各组成骨细胞碱性磷酸酶活性均随FAC浓度增高而降低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,FAC干预17d后成骨细胞钙结节染色显示矿化面积和钙结节形成随FAC浓度增加而减少。结论铁过载对成骨细胞生物活性有明显抑制作用,其机制可能与细胞内铁离子浓度增加及活性氧水平升高有关。

主 题 词:人成骨细胞 铁过载 铁稳态 活性氧 生物活性 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1674-2591.2013.01.008

馆 藏 号:203863776...

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